FISH tests

No FISH tests ir mikroskopisks hromosomu tests krūts vēža, kuņģa vēža un hroniskas limfoleikozes diagnosticēšanai pirmsdzemdību un karcinomas diagnostikā. Pārbaude, kuras rezultāts ir pieejams 1–2 dienu laikā, galvenokārt var atklāt hromosomu anomālijas, kuras var izsekot izmainītām hromosomu kopām dažās hromosomās. Pārbaudi veic tikai kā papildu vai provizorisku testu sīki izstrādātai hromosomu analīzei, kuras rezultāti ir pieejami tikai 2–3 nedēļas pēc šūnu noņemšanas.

Kāds ir FISH tests?

FISH tests (Fluorescences in situ hibridizācija) pirmsdzemdību diagnostikā ļauj izdarīt secinājumus par mainītu hromosomu kopumu noteiktām hromosomām. Lai veiktu FISH testu, ir vajadzīgas vismaz 50 neaudzētas augļa šūnas (amniona šūnas), kas ņemtas no amnija šķidruma (apmēram 2 - 3 ml). Alternatīva metode piemērotu šūnu iegūšanai ir horiona villus paraugu ņemšana, kurā šūnas no nabas saites piestiprināšanas vietas ņem biopsijas veidā.

Īpaša procedūra ļauj diferencēt atsevišķas 13., 18., 21. hromosomas un X un Y hromosomas ar fluorescējošām krāsām, lai iespējamā trisomija būtu pamanāma, ja hromosomas divu homologo virzienu vietā būtu trīs, nevis trīs . Kuņģa un krūts vēža gadījumā FISH testu var izmantot, lai pārbaudītu, vai audzējam ir vairāk nekā divas HER2 / neu gēna (cilvēka epidermas augšanas faktora receptoru) kopijas, kas ietekmē ķīmijterapijas veidu. Hroniskas limfoleikozes gadījumos biežākās hromosomu izmaiņas noteiktos gēnos var noteikt, izmantojot vairākas FISH testa analīzes paraugos no kaulu smadzenēm un perifērajām asinīm, kas arī ietekmē terapiju.

Funkcija, efekts un mērķi

Izolēto šūnu kodolu hromosomas tiek veidotas, lai sadalītu to dubultās spirāles struktūru ar īpašu ķīmisku apstrādi vai ar karstuma palīdzību, un hromosomām specifiskas DNS zondes ar atbilstošo komplementāro DNS secību savienojas ar “viņu” specifiskajām hromosomām. DNS zondes ir marķētas ar dažādu krāsu fluorescējošām krāsām, lai marķētās hromosomas varētu atšķirt viena no otras, izmantojot īpašu programmatūru, un saskaitīt automatizētā procesā.

Ir zināmi z. B. Trisomijas, kurās vienā hromosomā divu hromosomu virkņu vietā ir trīs, ir zināmas arī tā saucamās monosomijas, kurās ir tikai viena X hromosomas virkne un trīs vai četras visu hromosomu homologās virknes. Vissvarīgākās hromosomu izmaiņas, kuras var atklāt ar FISH testu pirmsdzemdību diagnostikā, ir Ulriha Tērnera sindroms (X monosomija), trīskāršā X sindroms (trisomija vai X polisomija), Klinefeltera sindroms, kurā visās vai daļai somatisko šūnu zēniem ir papildu X hromosoma (XXY, nevis XY), Dauna sindroms (21. trisomija), Edvarda sindroms (18. trisomija) un Patau sindroms (13. trisomija).

X monosomija, kurā meitenēm ir tikai viena X hromosoma, parasti ir letāla, kas nozīmē, ka aptuveni 98% gadījumu tas izraisa abortu pirmajos trīs grūtniecības mēnešos. Gadījumā, ja dzemdības tomēr notiek, meitenēm ir normāls dzīves ilgums, viņas ir vidēja intelekta, bet bieži cieš no vairākām iekšējo orgānu kroplībām un lielākoties ir sterilas. Trīskāršais X sindroms ar hromosomu komplektu XXX) ietekmē tikai meitenes. Iespējama normāla grūtniecība un dzemdības.

Pārsvarā garas sievietes ar trīskāršu X hromosomu var dzīvot normāli un parasti neuzrāda fiziskas novirzes, kaut arī mācīšanās grūtības nav nekas neparasts un rodas problēmas ar smalko motoriku. Klinefeltera sindromu, kas var skart tikai zēnus un vīriešus, raksturo papildu X hromosoma, kas atrodas visās ķermeņa šūnās vai tikai daļēji. Fiziskās īpašības pārsniedz vidējo augstumu ar neparasti garām rokām un kājām. Klinefeltera sindroms parasti samazina sēklinieku augšanu ar samazinātu testosterona izdalīšanos.

Dauna sindroms, kas sinonīms 21. trisomijai, lielākoties ir saistīts ar noteiktām fiziskām īpašībām un ar izziņas ierobežojumiem. Pastāv dažādas 21. trizomijas formas, no kurām aptuveni 95% gadījumu dominē tā saucamā brīvā trisomija 21. 18. trisomija (Edvarda sindroms) vairumā gadījumu izraisa abortu, ir saistīta ar dažādām fiziskām īpašībām, un dzīves ilgums ir tikai dažas dienas. 13. trisomijai (Pätau sindroms) ir raksturīgs arī liels skaits fizisko īpašību un nevēlamu notikumu attīstības, kas bieži izraisa aborts vai nedzīvi dzimušu bērnu. Dzīves ilgums bērniem ir tikai daži gadi.

Pirmsdzemdību FISH testa mērķis ir agrīnā stadijā atklāt zināmas hromosomu anomālijas, lai vecākiem piedāvātu alternatīvu likumīgu abortu, lai bērns tiktu dzemdēts. Krūts un aknu vēža gadījumā karcinomām var pārbaudīt palielinātu HER2 / neu gēna skaitu, izmantojot FISH testu. Pozitīvā gadījumā palielinās augšanas faktora receptoru veidošanās, kas reaģē uz noteiktām ķīmijterapijām. Ir pieejami arī FISH testi, lai identificētu specifiskas ģenētiskas anomālijas hroniskā limfoleikozes (CLL) gadījumā, kas uzlabo efektīvu ķīmijterapijas līdzekļu sastāvu.

Riski, blakusparādības un briesmas

Pats FISH tests nav saistīts ar riskiem vai briesmām. Tikai to šūnu ekstrakcija, kuras jāpārbauda ar biopsiju vai paraugu ņemšanu no amnija šķidruma (amniocentēze), ir saistīta ar nelielu infekcijas risku to invazīvā rakstura dēļ. Īpašā būtība ir tā, ka FISH tests var atklāt dažus specifiskus hromosomu defektus, taču nav skaidrs, vai negatīva rezultāta gadījumā nav hromosomu aberāciju, jo ne visas anomālijas var noteikt ar FISH testu. Ja testa rezultāts ir pozitīvs, jāveic turpmākās diagnostikas procedūras, lai apstiprinātu rezultātu vai noraidītu to kā nepatiesu.